开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
药品的微生物检查在药品检测中扮演着重要的角色。主要分为以下几类：无菌检查、微生物限度检查、微生物检定等。药品的生产过程都要进行微生物检测，生产药品的车间、原料药、辅料、纯化水、洗淋水、药液、成品等都需符合一定的标准。有些制品需要保证绝对的无菌，比如滴眼剂、静脉注射剂；大部分的片剂不需要如此严格的要求，但要符合一定的微生物限度，否则患者会受到大量细菌或真菌的感染，严重威胁患者的生命健康。
微生物检测包含多种方法，比如直接接种法、薄膜过滤法。直接接种法是将供试品或菌液倒入培养皿中，然后直接倒入与供试品或菌液相适应的培养基。该方法一般不使用，因为若直接在培养皿中加入过热的培养基，容易导致细菌或真菌的死亡；若需要对菌进行计数，直接接种法的结果则无法达到这样的要求。薄膜过滤法是比较普遍的使用方法，供试品或菌液通过反复过滤器或集菌器等装置，可将菌留在滤纸表面，最后将滤纸接种在合适的培养基上。或直接在集菌器中加入液体培养基，进行培养和观察。薄膜过滤法一般为首选方法，在样品无法进行薄膜过滤法操作的情况下，才使用直接接种法，比如手术使用的针线、放射性药品。
微生物检测中有大量的方法适用性检查。首先是培养基的适用性检查，在无菌检查、微生物限度检查等所有微生物检测中都是必要的。无菌检查是对培养基的无菌性和灵敏度进行检查。无菌性是指配制并灭菌过的培养基应培养相应天数后无菌生长，这是保证了供试品生长的菌不是培养基自带的，这也证明了培养基配制和灭菌过程的正确性。灵敏度检查是为了保证使用的培养基适合菌的生长，保证被污染的供试品能够通过相应的培养基检查出来。不同的培养基接种的菌种类也不同。微生物限度检查中的方法与无菌检查相似。
在无菌检查时，应进行方法适用性试验，确保使用的方法能将合格品通过、将污染品检测出。有的药品虽然不属于抗菌药品，但有一定的抑菌活性，如果这类药品受到微生物的污染，使用一般的方法很可能导致无法检测出污染的菌，从而使本身不合格的药品流入市场，造成严重的后果。无菌检查中的方法一般为将供试品中加入一定量的菌进行培养，取相同量的菌液培养作为对照，若供试品各容器中的试验菌生长良好，则判定该检验量下供试品无 抑菌作用或抑菌作用忽略不计；若试验菌生长微弱、缓慢或不生长，则判定供试品有抑菌作用。在非无菌产品微生物限度检查中也有相应的实验检查，实验一般设置试验组、供试品对照组和菌液对照组。试验组是供试液加入试验菌液进行培养，供试品对照组是供试品加入稀释液进行培养，菌液对照组是将稀释液加入试验菌液进行培养，若试验组菌落数减去供试品对照组菌落数的值小于菌液对照组菌落数值的百分之五十，则判定供试品在该检验量下有抑菌活性。
在确定供试品有抑菌作用的情况下，一般有以下方法进行药物微生物检测的改进。首先使用薄膜过滤法，增加缓冲液的体积，大量的缓冲液可以将供试品冲洗或稀释，使药品的抑菌作用减弱到忽略不计或消失。但是每张滤膜的总冲洗量不得超过1000ml，大量的冲洗可能导致微生物受到损伤，从而导致结果的假阴性。当增加缓冲液体积的方法不适用的时候，这时候就要在供试品中加入灭活剂或中和剂。抗生素的微生物检查中经常需要加入相应的中和剂或灭活剂，药典中列出了常见的抗生素使用的中和剂或灭活剂，如磺胺类药物使用对氨基苯甲酸，beta;-内酰胺类抗生素使用beta;-内酰胺酶，喹诺酮类抗生素使用镁或钙离子即可。有些时候可能不是药物本身有抑菌作用，在生产的过程中有不可避免的杂质出现，这些杂质有较强的抑菌效果，比如酚类、乙醇、汞制剂等。汞制剂选择亚硫酸氢钠，酚类和乙醇只能使用稀释法去除它们的抑菌效果。
本次课题基于非抗菌药品的抑菌活性，探索药品的抑菌作用会对一系列微生物检查造成的影响，从而改变通常的检测方法，寻找符合该品种的检测方法，提高鉴定结果的准确性。本次课题初步打算使用盐酸氯米帕明片作为供试品，探讨其抑菌的种类、抑菌的强度，从而研究合适的解决方案如加入缓冲液或中和剂、灭活剂。最后的实验结果最好能分析得到其抑菌的原因。与此同时，要保证使用的缓冲液和中和剂、灭活剂对菌无影响。若使用的中和剂、灭活剂能促进或抑制菌的生长，都是不可取的，即使用的化合物不能作为该药品的中和剂或灭活剂。研究过程应确定氯米帕明合适的检验量，正确运用阳性对照和阴性对照实验。实验方法确定使用薄膜过滤法。课题最后应得到理想的解决方案。
氯米帕明属于精神神经类药物，为三环类抗抑郁药。主要作用原理为阻断中枢神经系统去甲肾上腺素和多巴胺的重摄取，提高突触间隙的递质浓度，进而起到抗抑郁的效果。但由于其不良反应的发生率较舍曲林、帕罗西汀等高，安全性较低，所以逐渐被其他新型抗抑郁药所代替。而如今对氯米帕明的研究大部分围绕其与其他抗抑郁药的联合用药展开。本课题希望通过对氯米帕明的抑菌性研究，深入了解微生物检测的方法内涵，从而理解药品生产中QC微生物部门的重要作用。
本课题的操作方法主要参考2015版中国药典。
