开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一.拟研究的问题
食管鳞状细胞癌是世界排名第八位的常见恶性肿瘤。食管鳞癌的常用治疗方法有手术切除、化疗和放疗,然而这些治疗方案的结果却往往不尽如人意,患者的 5 年生存率才 30%左右。研究者们普遍认为,食管鳞癌的发生发展可以归因于遗传易感性、环境因素以及基因与环境因子的相互作用。最近研究发现,一些 LncRNA 在哺乳动物的 RNA 转录后加工、基因调控,特别是肿瘤发生过程中起着重要作用。本课题主要对检测长链非编码TTNF在食道癌细胞Eca-109的相关情况进行研究,以期得到最佳实验条件。
二.实验目的
本研究利用培养食道鳞癌细胞Eca-109,转染慢病毒表达载体并建立稳转细胞系,同时对RNA进行提取逆转和实时荧光定量。分析转染和定量结果,观察模型是否成功。为进一步合理开发利用长链非编码RNA资源提供理论基础和研究思路。
三.实验方法
本实验的研究包括以下几项内容:
1 培养食道鳞癌细胞Eca-109
2 慢病毒表达载体的转染和稳转细胞系的建立
3 RNA的提取,逆转和实时荧光定量 PCR
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