人血清白蛋白-人粒细胞集落刺激因子融合蛋白的纯化摘要:人血清白蛋白是(Human Serum Albumin,简称HSA)血浆的重要成分之一,在体内的分布广泛且免疫学活性,是一种理想的生物活性蛋白载体。
粒细胞集落刺激因子(Granulocyte colony stimulating factor 简称G-CSF)能启动机体保护机制抵抗感染,但在体内的半衰期短,给药后快速降解。
通过基因工程技术将HSA基因片段与G-CSF基因片段相连接得到的人血清白蛋白-人粒细胞集落刺激因子融合蛋白(HSA-G-CSF融合蛋白),可以延长G-CSF的半衰期,增加药物的作用时间。
采用GE最新复合型填料Capto MMC,并从上样电导,上样载量,预洗条件以及洗脱条件等几个方面,详细摸索了Capto MMC的整个层析过程,得到了一个能够快速有效捕获HSA-G-CSF融合蛋白的方法。
本文综述了如何使用层析技术从发酵液中快速捕获HAS-G-CSF融合蛋白的方法。
关键词HSA-G-CSF融合蛋白 ,纯化1、人血清白蛋白概述人血清白蛋白(Human Serum Albumin,简称HSA)是人血浆中的蛋白质,是人血清中含量最高的成分,分子量为66kD,约占血浆总蛋白的60%{1}。
HSA在体内的生理作用主要是能维持血液的正常渗透压并且是物质的运输载体,维持蛋白质的正常pH 值,它在体内半衰期长,安全无毒而且没有免疫原性【2】。
因此成为改善药物半衰期的理想的载体蛋白。
2、粒细胞集落刺激因子概述粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是一个由174个氨基酸组成的蛋白质,其分子量是20kD。
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