课题名称 JLX001在永久性脑缺血损伤中对氧化应激的影响课题性质 基础研究 radic; 应用课题 设计型 调研综述 理论研究开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)拟研究及解决的问题:熟悉并了解大鼠永久性脑缺血损伤中对氧化应激的影响和研究进展。
学习并熟练掌握大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型的制备方法。
掌握神经功能评分、脑梗死率、脑组织含水量的测定方法。
掌握血浆生化指标的测定方法。
根据临床前研究指导原则的要求,研究JLX001对大鼠永久性脑缺血损伤的保护作用及其主要的药效学作用,为进一步开发该药提供试验依据。
研究手段:一、实验所用动物为SPF级雄性SD大鼠,体重250-300g,随机分为8组,每组10只,分别为JLX001高剂量组1.2mg/kg,中剂量组0.6mg/kg,低剂量组0.3mg/kg,阳性对照依达拉奉组6mg/kg,阳性对照奥扎格雷组6mg/kg,阳性对照银杏二萜内酯葡胺组2.5mg/kg,另设假手术组及缺血模型对照组(均给以等容积的生理盐水)。
参考Longa等人的方法,采用颈内动脉线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,于术后3h尾静脉给药,每日尾静脉注射一次,连续给药5天。
末次给药1h后,按Bederson的方法对动物的神经功能缺陷进行分级评分。
上述指标测定后,脱颈椎处死大鼠,取出全脑称重。
在视交叉及其前后各2mm处,做冠状切四刀,置于5ml含有1%TTC的磷酸缓冲溶液中避光温孵染色30分钟,在温孵过程中每隔7~8分钟翻动一次,取出脑片,观察脑组织染色情况并用数码相机拍照记录,之后用眼科镊分离苍白区(梗塞区)和非苍白区(正常区),计算梗塞百分比和脑组织含水量。
