开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
选题依据：
目前恶性肿瘤成为危害人类生命和健康的多发病和常见病，死亡率居于各种疾病的首位。化疗是清除肿瘤的有效手段之一，对原发灶、转移灶和亚临床转移灶均有治疗作用，也是目前应用最多的手段。但是化疗药物的选择性差，在作用于肿瘤细胞取得治疗效果的同时对正常的细胞产生很大的杀伤作用，靶向性不明显，使机体免疫力下降，产生骨髓抑制、脱发等毒副作用，很大程度上限制其应用，因此需要寻找方法在保证化疗药物疗效的同时降低其毒副作用。近些年来，药物靶向运输载体成为新的研究方向，它可以利用一种药物靶向载体把化疗药物运输到肿瘤部位，从而消除或降低其毒副作用。
聚酰胺-胺型（Ployamidoamine,PAMAM）大分子是近些年蓬勃发展的化疗药物载体和基因转染载体的新型高分子聚合物，具有低毒性、高细胞通透性、强大的载运能力和良好的生物相容性等特点。自20世纪80年代中期Tomalia等人首次合成了树枝状高分子PAMAM以来，至今已合成了1-8代PAMAM树枝状大分子。PAMAM是一种分子大小、形状和官能团精确可控的纳米材料，分子内部具有广阔的空穴，便于物理包载小分子客体分子，表面存在大量可控基团，这些特性便于化学结合药物和对其进行修饰，从而提高其水溶性、脂溶性、靶向性，使之成为生物大分子、核酸、化疗药物等的载体，然而至今其各代之间的性质及应用比较未进行系统性评价，需要开展进一步的研究探索。
研究背景：
聚酰胺-胺型树状大分子是以乙二胺为核，通过迈克尔加成反应和酯胺解反应这两个重复的步骤合成的，使用核磁氢谱、碳核磁共振波谱和质谱等证明了树状大分子结构。由于PAMAM内部具有广阔空腔，分子内部和外部具有大量的活性官能团的特点，可以将表面的氨基在生理活性下易质子化而使其带有较高的正电荷，因此具有比较高的毒性。PAMAM分子空穴和表面的氨基基团有利于它们与药物、抗体、核酸和荧光基团通过静电作用形成稳定的复合物。近些年，由于发展需求对树状大分子进行了各种修饰，使之更适合作为药物的运输载体。
前期研究中，聚乙二醇（PEG）常用来修饰PAMAM已降低其毒性，增加其生物相容性并实现长循环。Kojima①等人对PAMAM进行PEG修饰，对阿霉素（DOX）和甲氨蝶呤（MTX）具有很高的载药量，不仅在一定条件下可以实现对阿霉素和甲氨蝶呤的缓释作用，而且同时加强了载体的生物相容性。Kubo②等研究发现，纳米磁性脂粒体包埋阿霉素具有更好的抗肿瘤作用。美国密西根大学Majoros③研究对合成的第五代PAMAM进行修饰，修饰后的PAMAM其溶解性明显提高，对细胞未产生毒性，连接紫杉醇后其药效和游离的紫杉醇相当。由于高分子PAMAM树枝状结构有很大的共轭体系，所以本身的荧光性较强。PH对它们的荧光强度有很大影响，同时也有一定的紫外可见光吸收④。利用荧光法，不同代数和不同末端基团的PAMAM树状大分子在水溶液中与牛血清白蛋白的相互作用和相互机制研究发现PAMAM和BSA的相互作用决定于其末端基团的数量和种类，加入PAMAM后，BSA的构象发生改变⑤。PAMAM大分子以其独特的物理化学性质能够成为化疗药物的运输载体，但是目前国内对其的研究还比较初步，还存在很多未知的因素，对于在人体内肿瘤治疗的应用，都还需要进一步深入的研究。
目的及意义：
本课题拟对1-6代PAMAM在PEG修饰后包载阿霉素（DOX)进行系统性比较评价，通过核磁图谱、紫外吸收光谱、粒径电位、CCK8、荧光摄取及流式分析实验等研究方法和手段，系统性分析比较不同代数之间PAMAM性状、包载能力、细胞摄取、毒性及药效等方面差异及不同的因素对PAMAM大分子体外稳定性的影响，从而对其特征及性状有更深入的了解，以期于后期对PAMAM的研究应用具有参考意义，为其作为新型药物载体提供理论依据。
方法与步骤：
