基于Crispr/Cas9系统的大肠杆菌基因组改造研究文献综述

 2023-02-25 20:21:49

摘要 CRISPR-Cas9系统是近年来发展迅速的一项基因定点修饰技术。

它是基于细菌或古细胞CRISP介导的获得性免疫系统衍生而来的一段聚集的有规律的间隙短回文。

由一段RNA通过碱基互补配对识别DNA,指导Cas9核酸酶切割别的双链DNA,引导同源重组或非同源末端连接,从而完成在目的基因的编辑。

自CRISPR-Cas9被发现后,因其设计便捷,切割效率更高,成本较低,应用范围广,并且适用于多种基因编辑而被广泛应用。

本文主要从CRISPR-Cas9的结构原理及其在基因编辑上的应用进行了综述。

关键词CRISPR-Cas9;原理;基因编辑;应用Principle of CRISPR-Cas9 and Application in Gene EditingJI QIANMIN 047214140AbstractThe CRISPR-Cas9 system is a rapid genetic modification technique in recent years. It is a cluster of regular gap short palindromes derived from bacterial or ancient cell CRISPR-mediated acquired immune systems. It recognizes DNA by a pair of RNAs through base-pair pairing, helps Cas9 nucleases cleave other double-stranded DNA, and directs homologous recombination or non-homologous end joining, thereby completing editing of the target gene. Since the discovery of CRISPR-Cas9, it has been widely used because of its convenient design, higher cutting efficiency, lower cost, wide application range and suitable for a variety of gene editing. Summarized here is the principle and applications in gene editing.Key WordsCRISPR-Cas9; Principle; Gene Editing; Application 基因编辑技术是通过人为操作指导特定基因的插入、缺失或替换等,对基因组进行精确修饰和定向改造的一项技术。

该技术可以研究基因在生物学和疾病中的功能和分子机制。

多项研究结果表明CRISPR-Cas9系统相比于其他同类技术,具有明显的高效性、准确性,被大量用于对微生物的基因编辑。

早期,科研人员通常会采用同源重组介导的基因打靶技术来实现基因编辑,如使用基于lambda;-噬菌体的Red同源重组系统和核酸内切酶I-Scel切割筛选相结合的方法对大肠杆菌进行基因敲除[1]。

其主要通过连续两步的同源重组实现实验目的。

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