开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)一、立项依据1.课题拟研究或解决的问题1.1 建立一种多肽HM-3的含量检测方法1.2研究局部给药后HM-3在眼部各组织的浓度。
2.研究背景介绍2.1 多肽HM-3近年来,抑制血管生成药物治疗肿瘤,已成为被FDA认可批准并具有可观前景的治疗方法。
新型多肽HM-3是由中国药科大学自主研发设计合成的含有18个氨基酸的一种多靶点、小分子多肽,因其序列中有部分序列与内皮抑素同源(11个氨基酸),故不仅具有内皮抑素抑制新生血管的活性,同时,因为含有RGD结构域,它能与整合素alpha;vbeta;3特异性结合,又可以通过整合素的信号转导通路抑制血管内皮细胞的增殖和迁移。
体外和体内实验均表明,HM-3能有效抑制血管内皮细胞的发生、增殖和迁移,并能减少鸡尿囊胚新生血管面积。
这些初步研究表明,该多肽具有有效抑制肿瘤血管生成的作用,多点新型多肽HM-3药物靶点明确并且效果显著、制备简单、质量可控,可能比单点药物对肿瘤的治疗效果更优越,有望制成实体瘤(包括胃癌肝癌)的治疗药物。
此外,进一步的药物基因组研究对揭示药物作用机制以及未来指导个性化治疗将有很大的助益。
2.2药物含量常用检测方法药物的含量测定指运用化学、物理化学或生物学的方法测定药物中主要有效成分的含量。
常采用采用Folin-酚试剂法(Lowry法)、染色法(Bradford法)、双缩脲法、紫外吸收法和HPLC法等方法,其中Lowry法和Bradford法是在质量检定中经常使用的方法 2.2.1 Lowry法 优点:方法简便,灵敏度较高;所用仪器简单,不同T间的变异少,需时约40min,优先采用。
缺点:Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此蛋白质中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用;不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。
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