【研究的主要目的和意义】
硫辛酸（Thioctic Acid）是安全有效的治疗糖尿病周围神经病变的药物，其对临床症状及神经传导速度均有改善作用。糖尿病是一种综合性的代谢紊乱疾病，可并发多种疾病，其发病机制与活性氧自由基及蛋白质糖基化有关。而糖尿病周围神经病变是糖尿病又一常见的慢性并发症，发生率达50%-60%，其发病机制比较复杂，如自由基损伤、脂肪酸代谢异常及高糖引起的微血管病变等。一般糖尿病的治疗根据其发病机制来选择合适的药物来治疗，分为Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病。糖尿病周围神经病变的治疗不仅仅需要控制人体血糖水平，而且需要根据其可能的发病机理来采取治疗，比如使用抗氧化剂硫辛酸。硫辛酸的作用机制是抑制脂质过氧化；保护内皮功能；增加神经Na -K -ATP；增加神经营养血管的血流量；改善神经传导速度等。2001年德国有十几家制药企业生产个汇总硫辛酸制剂。我国于2000年批准德国史达得公司的硫辛酸注射液进口，其商品名为奥宝力，规格为300mg/12ml/支。目前硫辛酸市场销售以注射剂为主，而硫辛酸片国内的批准生产厂家就两家。因此，我公司准备仿制该品种，采用高效液相法测定其含量，进行含量测定时使用的分析方法需要验证，证明采用的高效液相法测定含量是适合于分析要求的。
【拟研究或解决的问题】
- 熟悉药品质量研究的一般流程；
- 了解方法学验证的基本步骤和研究方法；
- 验证试验的分析方法适用于硫辛酸的含量测定；
- 熟悉高效液相法的仪器使用和操作要求。
【采用的研究手段及文献综述】
因为硫辛酸片的含量测定采用的是高效液相法，根据国家药典上的分析方法验证的指导原则可以直接对这个方法进行方法学验证。
- 仪器和药品
高效液相色谱仪（岛津公司生产），电子天平等。样品来自南京瑞尔医药有限公司和山东齐都药业有限公司。
2.测定方法的准确度
用已知纯度的对照品做加样回收率测定，即于已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的已知纯度的被测成分对照品，依法测定。用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。
在加样回率收试验中须注意对照品的加入量与供试品中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之内；加入的对照品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差。
回收率 %=[(C-A)/B]*100% 式中，A 为供试品所含被测成分量； B 为加入对照品量； C 为实测值。
验证时一般要求分别配制浓度为80％、100％和120％的供试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。
在规定范围内，取同一浓度的供试品，用 6 个测定结果进行评价；或设计 3 个不同浓度，每个浓度各分别制备 3 份 供试品 溶液进行测定，用 9 个测定结果进行评价，一般中间浓度加入量与所取 供试品 含量之比控制在 l ∶ 1 左右，其他两个浓度分别约为供试品含量的 80% 和 120%。根据供试品取样量、供试品中含有量、对照品加入量、测定结果和回收率 ( ％ ) 计算值，以及回收率 ( ％ ) 的相对标准偏差 (RSD) 或可信限。
