开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）拟研究的问题：内源性DNA烷基化损伤是导致DNA复制错配及基因突变的重要原因，多种因素都可以导致内源性DNA烷基化损伤。
DNA烷基化损伤的修复依赖于ASCC信号激活辅整合素复合物的调控，现有的研究已经证明了ASCC1附属亚基对调节ASCC复合体功能非常重要。
ASCC1通过ASCC3解旋酶亚基与ASCC复合物相互作用，在烷基化损伤期间，ASCC1可以协调ASCC复合物的招募。
短发夹RNA(shRNA) 通过载体（质粒或病毒）转染到细胞内，在细胞内转录生成shRNA，利用细胞内的Dicer酶，生成相应的siRNA，发挥RNAi作用。
其中病毒感染细胞的效率较高，解决了质粒对于某些细胞类型（例如原代细胞和分裂较少的细胞）转染效率低的问题。
shRNA可以通过病毒或质粒介导的转染保持稳定。
稳定转染的细胞常通过嘌呤霉素进行筛选，干扰的持续时间更久。
本研究通过利用Lentiviral shRNA体系构建稳定消减ASCC1的细胞株，为研究ASCC1修复DNA烷基化损伤的功能奠定基础。
实验主要内容:1) 构建基于Lentiviral shRNA体系的ASCC1消减质粒。
剩余内容已隐藏，您需要先支付 10元 才能查看该篇文章全部内容！立即支付
