课题名称 ASCC2消减的3T3-L1细胞株构建课题性质 radic;基础研究应用课题 设计型 调研综述 理论研究开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)一、课题研究的背景和意义:慢病毒载体作为一种非复制重组病毒载体,适合于长期shRNA表达和基因沉默。
其病毒DNA被整合到宿主基因组中,能够有效地传递shRNA导致持续的siRNA表达。
内源性DNA烷基化损伤是由多种因素引起的,导致DNA复制错配及基因突变的重要原因。
DNA烷基化损伤的修复依赖于ASCC信号激活辅整合素复合物的调控。
构建基于Lentiviral shRNA体系的ASCC2消减质粒,检测ASCC2消减对细胞增殖功能的影响有助于了解DNA烷基化损伤的修复机制。
二、实验主要内容:1.构建基于Lentiviral shRNA体系的ASCC2消减质粒。
2.包装用于ASCC2消减的病毒颗粒,构建及筛选ASCC2消减细胞株。
3.检测ASCC2消减对细胞增殖功能的影响。
4.数据整理,完成论文撰写。
三、研究方法:3.1 shRNA 的设计与合成根据 shRNA设计的一般原则设计。
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