【拟研究或解决的问题】《伤寒杂病论》所载吴茱萸汤,用于治疗阳明病、少阴病、厥阴病及呕吐下利杂病等,方中所用四味药材分别是:吴茱萸、人参、生姜和大枣。
随着对四味中药的研究与开发,发现四位中药均含有具氧化作用的化学成分,如:吴茱萸挥发油、人参皂苷、生姜黄酮、大枣多糖等。
吴茱萸汤作为包含四种药材的汤剂却缺乏相关抗氧化作用研究。
因而对吴茱萸汤进行抗氧化作用的检测与评估,可为吴茱萸汤的药理研究提供有一定参考价值的信息。
【研究手段】为了研究吴茱萸汤的抗氧化能力,选取ABTS清除能力法与DPPH清除能力法对其进行测定。
1.ABTS清除能力法将吴茱萸、生姜、人参和大枣四味药材按照比例煎煮成汤剂,过滤浓缩成样品液,备用。
配制7mmol/L的ABTS与2.45mmol/L的过硫酸钾溶液,等体积混合后避光放置16 h,配得ABTS储备液。
使用前用无水乙醇将储备液稀释至在734nm波长下的吸光度2.000.10的ABTS工作液。
取ABTS工作液30ml与样品液3ml,室温反应6 min后迅速在波长734nm处测定,测得吸光度为A样品;同样方法取ABTS工作液30ml与甲醇3ml,测得吸光度为A空白;取甲醇30ml与样品液3ml,测得吸光度为A对照,按照下列公式计算清除率:ABTS自由基清除率/%=[1-(A样品-A对照)/A空白]100%2.DPPH清除能力法将吴茱萸、生姜、人参和大枣四味药材按照比例煎煮成汤剂,过滤浓缩成样品液,备用。
准确称4mg DPPH溶于无水乙醇并定容至100 ml,配得100mu;mol/L DPPH储备液。
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