开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题背景
肝损伤，是肝脏受外界因素的入侵而导致的肝脏受损，或是由各种肝脏疾病产生的病变结果，是一种临床常见的对人类健康有危害的疾病。肝损伤往往伴随多种并发症的产生，其中，肝性脑病（也称肝昏迷HE）是肝损伤的主要并发症中的一种。
肝性脑病，是一种以代谢紊乱为基础的中枢神经系统功能失调综合征，其发病机制未完全明确，但引起肝性脑病的重要原因包括：脑内神经毒性或活性物质的累积，而脑内物质平衡紊乱又与BBB的功能改变密切相关。血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)是脑部环境稳态的主要调控因素，它由脑微血管内皮细胞 (brain microvascular endothelial cells, BMECs)和紧密连接构成的机械屏障、脑内药物外排系统（ABC类转运体为主）和药物代谢酶屏障共同组成，它的主要功能是限制多种物质通过BBB 进入脑内并保持脑部内环境的相对稳定。然而，肝损伤和感染等多种因素，可以经由不同的方式影响BBB的功能，使一些原本难以透过BBB的物质进入脑内，从而打乱脑内物质平衡，最终导致一些中枢神经系统并发症的发生。
血脑屏障上存在着多种ABC（ATP-binding cassette）类转运体，此类转运体可以与ATP 结合，并利用ATP直接供能跨膜转运物质，它参与各种类型的底物的外排式跨膜转运（如氨基酸、多肽、蛋白质、一些药物以及多种脂溶性物质）。已知至少有8种ABC转运体参与BBB 上药物外排转运，如乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein，BCRP/Bcrp）、多药耐药相关蛋白1-6（multidrug resistance-associated protein，MRP1-6/Mrp1-6）以及P- 糖蛋白（P-glycoprotein ，P-GP/P-gp）等。其中，BCRP具有将脑血管内皮细胞中物质泵回血液中的功能，且拥有广泛的底物，它的存在是一些药物难以进入脑内的主要原因之一。
BCRP作为BBB上高度表达的一种ABC类外排转运体，其底物有多种抗癌药，如米托蒽醌、伊立替康、弗拉平度及内源性的叶酸、脱氢表雄酮硫酸酯等，所以BCRP是一种抵御对毒性物质及外源性物质的防御机制，对机体的内环境稳态具有重要意义。
我们发现，在化学肝损伤时，会出现BCRP功能和表达的下调，并伴有血氨水平显著上升。
高血氨是肝损伤的主要病理特征，同时高血氨又是引起肝性脑病的主要因素。有文献报道，高血氨引起的脑血管跨膜通透性增加与氧化/硝化应激有关[9]，而氧化应激本身又会影响BBB上P-GP的功能与表达[10,11]。因此，高血氨及其引起的脑内氧化应激和炎症反应可能是肝损伤时BBB上ABC类转运体表达与功能改变的重要因素。
多篇文献证明，进行肝损伤伴随着氧化/氮化应激（ONS）。而氨，也被证明在多种中枢神经系统细胞，例如神经元细胞，小神经胶质细胞及脑微血管内皮细胞上诱发ONS。氧化应激涉及到多种信号通路,例如MAPK，NF-кB，AMPK等。Hongliang Dai 证明，在星形胶质细胞上3mM的氯化铵即可激活Na,K-ATP酶，EGF受体，促进Erk1/2，AKT。Zielinacute;ska发现，高血氨可下调NO/cAMP通路。
- 要解决的问题
1、体内实验模型建立，包括硫代乙酰胺（TAA）诱导的肝损伤模型与醋酸铵诱导的高血氨模型。
