开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一 实验背景
甘草酸（glycyrrhizic acid）是甘草的有效成分，其在体内水解产物甘草次酸（glycyrrhetinic acid）的化学结构与甾体激素颇为相似，作为配体竞争性地抑制糖皮质激素的代谢失活酶，所以表现出激素样作用，其本身也能竞争糖皮质激素受体，表现出部分激动拮抗剂的特征。因此临床上甘草酸用于肝炎、肾炎、肺炎、脑炎、皮炎及各种变态反应性疾病时较少出现糖皮质激素样不良反应，在增强糖皮质激素抗炎、抗变态反应和抗应激作用的同时也可减少或减轻激素的不良反应及停药反应和依赖性。但把甘草酸和甘草次酸的抗炎、抗变态反应作用完全归因于其糖皮质激素样作用则不够全面。了解近20 年的甘草酸和甘草次酸的抗炎、抗变态反应药理研究进展，将有利于临床上正确与合理应用。变态反应实际上就是免疫特异性炎症反应，与非特异性炎症反应比较，变态反应性炎症多了抗原致敏和攻击两个过程。甘草酸和甘草次酸对非特异性炎症和变态反应性炎症都有抑制作用，提示其可能具有多种复杂的作用机制。甘草次酸是甘草酸在体内的水解产物，而甘草次酸的抗变态反应性炎症和非特异性炎症反应的作用明显强于甘草酸，所以甘草酸可能是甘草次酸的前体药物。甘草酸选择性诱导成熟的T 淋巴细胞凋亡，调节淋巴细胞数量和功能，纠正外周血T 淋巴细胞亚群的紊乱。甘草酸抑制抗体（IgG、IgE）生成，多靶点地抑制补体系统，抑制炎性细胞因子和炎症介质生成，以及对抗炎症介质的致炎作用。提示甘草酸对炎症发生、发展和反应等许多环节均有对抗作用。然而甘草酸对其中哪一个环节的作用是最重要的，现有研究资料尚未得出结论。炎症介质之间、炎性细胞因子之间以及炎症介质与炎性细胞之间往往是相互影响，互为因果关系。因此，很有必要建立甘草酸的检测方法并研究甘草酸对细胞内外各条炎症信号转导通路的影响，探讨甘草酸对其中哪一条信号转导通路的影响最为重要。在研究对各个环节或信号转导通路的影响时，最好能进行细化（不同时间段），找出甘草酸作用的启动点、起始点在什么靶点上，这些研究可能揭示甘草酸的确切抗炎机制，建立和开发检测方法则是在这些研究中起到关键作用。
螺内酯(spironolactone)化学名为7alpha;-乙酰硫基-17-羟基-3-氧-1 7alpha; -孕甾-4--21-羧酸-gamma;-内酯,为人工合成的类固醇类药物。它是醛固酮的竞争性拮抗剂, 能够干扰醛固酮保
钠排钾的作用螺内酯是一种使用了40多年的利尿药, 在临床上常用于治疗原发性高血压和伴有醛固酮增高的水肿 。近年研究发现 , 它在充血性心力衰竭中的作用, 显示了其广阔应用前景。螺内酯的血浆清除率很高, 经口服吸收之后, 迅速转化成代谢产物。其中,主要活性代谢产物之一为坎利酮。
二 实验目的
临床上甘草酸用于肝炎、肾炎、肺炎、脑炎、皮炎及各种变态反应性疾病时容易出现糖皮质激素样不良反应，产生不良反应的主要原因是体内钾离子浓度增高，而螺内酯具有保钠排钾的作用，可以两种药物在临床联合应用，降低体内钾离子浓度，降低不良反应的发生率，因此本实验需要开发并建立甘草酸和螺内酯LC-MS/MS检测方法并应用在临床药物使用中。
三 实验方法
目前有关甘草酸及黄甘草酸体内分析方法的研究，文献报道有LC-UV法,LC-电化学法(ECD)及 LC-MS法。但LC-UV法灵敏度低，干扰大，且分析时间长，不利于对二者进行检测。LC-ECD法灵敏度虽然高，但应用不普遍，所以LC-MS/MS法就成为了测定甘草酸的较为快速、高效且灵敏度高的方法。基于此我们尝试用实验室现有的串联质谱仪API3000建立甘草酸的质谱检测方法。
- 溶剂的选择
初步选择甲醇作为甘草酸的溶剂
- 内标的选择
初步拟定羟基 苯甲酸丁酯为内标物
- 色谱柱条件的优化
3.1`色谱柱的选择
由于待分析的黄芩苷及黄芩素均属于中等极性的化合物，本文决定采用C18柱进行色谱分析。
