一、研究背景AKT是通过磷酸肌醇被募集到质膜而被激活的一种蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶。
AKT 的分子量约为 60kD，由 480 个氨基酸组成。
AKT 在机体内具有3个亚型: AKT1、AKT2、AKT3(也称 PKBalpha;/beta;/gamma;)，它们在氨基酸的排列顺序上有80%的同源性，但亚型间也有不同的生理学特点。
近年来，关于AKT 的研究表明，由于AKT 的3种亚型在不同的组织中有不同的表达情况， AKT1 广泛的表达在哺乳动物的各种组织中；AKT2 则在胰岛素应答组织中有高效的表达，如肝脏和骨骼肌；而 AKT3 则在脑和睾丸中表达较多。
AKT2 能被细胞内的激素、生长因子、细胞因子、细胞间基质等多种物质激活，其主要活化途径是 PI3K-AKT2 信号通路的传导。
二、研究目的通过骨骼肌C2C12细胞和动物实验验证AKT2在骨骼肌发育和糖代谢中的作用及相关分子机制。
三、研究内容使用骨骼肌C2C12细胞，采用siAKT2细胞模型，以及使用不同年龄和性别的AKT2基因敲除小鼠，与野生型小鼠比较葡萄糖代谢相关指标，以及检测骨骼肌中糖代谢相关分子的表达，确定骨骼肌细胞中AKT2在调节糖代谢过程中的重要作用和信号通路。
四、实验材料1.实验动物3-8月龄的雄性、雌性野生型和 AKT2 敲除小鼠，清洁级，在12h昼夜交替、25℃恒温通风、50%-60%湿度的动物房内按性别、年龄分笼饲养，自由进食和饮水。
2. 实验试剂 葡萄糖、小鼠血清胰岛素检测试剂盒、苏木素-伊红染液、异氟烷、 4%多聚甲醛、水合氯醛、二甲苯、环保型 GD 固定液、注射用无菌生理盐水、石蜡、PBS、无水乙醇、氨水、液氮、中性树胶 3. 仪器 卓越型血糖仪、卓越金瑞血糖试纸、制冰机、电子天平、高速台式冷冻离心机、荧光倒置 显微镜、分析天平、微量移液器、旋涡混悬器、冰箱、-80℃超低温冰箱、小型离心机、包埋机、电磁炉、病理切片机、病理切片扫描仪、液氮罐、电热恒温鼓风干燥箱、数显鼓风干燥箱、 数显恒温箱五、实验方法1.试剂配制20%葡萄糖溶液配制、0.075U/ml 胰岛素溶液的配制、培养基的配制、免疫荧光封闭液（BlockingSolution，BS）的配制2. 动物分组新生小鼠分为野生型（WT）和 AKT2 基因敲除（AKT2 KO）组，每组不同年龄段（1-8月，按月分组）的雌、雄各 5只，两组均自由饮食和饮水。
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