开题报告内容:
研究背景:克里唑替尼,化学名为3-[( 1R) -1-( 2,6-二氯-3-氟苯基) -乙氧基]-5-[1-( 4-哌啶基) -1H-吡唑-4-基]-2-吡啶胺,是由辉瑞公司开发的c-Met和ALK 双靶点小分子酪氨酸激酶受体抑制剂,2011 年由美国FDA 批准用于治疗间变性淋巴瘤酶激酶( ALK) 阳性的晚期或转移性的非小细胞肺癌,目前正在进行针对复发性儿童间变性大细胞淋巴瘤、复发性神经母细胞瘤、炎性成肌纤维细胞瘤、恶性间叶肿瘤、神经系统肿瘤等实体瘤的Ⅰ/Ⅱ期临床试验研究。其化学合成路线多数都存在原料或催化剂昂贵、反应时间长、后处理繁琐及收率较低等问题。本文研究一种生物催化的方法合成其前体(S)-1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙醇,利用葡萄糖脱氢酶和乙醇脱氢酶的双酶偶联将2,6-二氯-3-氟苯乙酮的酮基还原成醇基,并保持S构型。
酶作为催化剂的大规模应用受到生产和纯化成本太高,在生产条件下极易失活,自由酶难以回收重复利用等原因的限制,通过对酶进行固定化通常可以克服酶使用过程中的不足。
研究的目的和意义:本毕业论文旨在对葡萄糖脱氢酶和乙醇脱氢酶的固定化进行研究,以确定固定化的条件,如温度,PH,交联剂的用量,还有不同种类型固定化的比较和研究,找到最适的固定化方法。
技术路线及实验方案:
拟进行有载体固定化和无载体固定化的研究。
(一)有载体固定化采用的树脂有Seplite LX-1000HA, Seplite LX-1000NH, Seplite LX-1000EP(C),LKA-128。
1. Seplite LX-1000HA的固定化
a.配制PH8.0的0.1mol/L的磷酸缓冲液,取3g树脂于15ml的磷酸缓冲液中,搅拌1h
b.3700r/min离心10min后,用去离子水洗3遍后回收树脂。
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