JLX治疗给药对局灶性脑缺血损伤的保护作用
开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
课题背景:通过阿司匹林、氯吡格雷、金纳多等药从而探寻JLX对局灶性脑缺血保护作用。临床上局灶性脑缺血的治疗手段和临床效果仍在不断研究中,此项研究以大鼠模拟局灶性脑缺血,研究JLX治疗给药对局灶性脑缺血的保护作用。
课题目的:研究JLX治疗给药对局灶性脑缺血损伤的保护作用的不同效果,从而对为受试药的进一步研究提供实验依据。
实验流程:
一、JLX缺血后3 h给药对局灶性永久性脑缺血大鼠神经功能、脑梗塞范围和脑含水量的影响
取清洁级雄性SD大鼠64只(实际需要128只,因为成模率为50%左右),体重250-300g,参考Longa等人的方法,采用颈内动脉线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型:大鼠用3%水合氯醛(300mg/kg)腹腔注射(ip)麻醉,仰卧手术台上,颈部正中切口,暴露右侧颈总动脉,向外牵引二腹肌及胸锁乳突肌,由颈总动脉分叉处向头端依次游离,结扎并剪断颈外动脉的分支:枕骨下动脉和甲状腺上动脉。在颈外动脉远端结扎,切断颈外动脉使其主干游离备用。然后分离颈内动脉,用丝线在颈外动脉根部打一松扣,夹闭颈总动脉和颈内动脉。将渔线(长40mm,直径0.26mm)经颈外动脉主干切口,缓慢向颈内动脉入颅方向推进,当渔线进入颈内动脉后松开颈内动脉上的动脉夹。以颈总动脉分叉处为标记,推进18mm左右时感到阻力,即达到了较细的大脑前动脉内,阻断了MCA的所有血供来源,扎紧颈外动脉根部松扣。缝合皮肤,完成MCAO导致永久性脑缺血模型。假手术组大鼠麻醉后,仅暴露颈内外动脉分叉,不闭塞MCA。分别于手术后3h灌胃给药,按体重性别随机分为8组,每组8只,分别为JLX高剂量组2.4mg/kg、中剂量组1.2mg/kg、低剂量组0.6mg/kg,阳性对照药氯吡格雷组7.5mg/kg;阳性对照药金纳多组15mg/kg,阳性对照药阿司匹林组30mg/kg,另设假手术组及缺血模型对照组(均给以等容积的0.5%CMC-Na)。MCAO后3 h开始给药,每天灌胃给药一次,给药容积为0.5 ml/100 g体重,连续给药15天。
渔线的制备:将一长40mm,直径0.26mm的渔线的一端用记号笔标记,在距离此标记端18mm处用记号笔再做一标记,置于生理盐水中备用。
于末次给药后1h按Bederson的方法对动物的神经功能缺陷进行分级评分,标准如下:
0分:未观察到神经症状;
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