开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、课题目的与意义
胞二磷胆碱为核苷衍生物,通过降低脑血管阻力,增加脑血流而促进脑物质代谢,改善脑循环。另外,可增强脑干网状结构上行激活系统的机能,增强锥体系统的机能,改善运动麻痹,故对促进大脑功能的恢复和促进苏醒,有一定作用。目前,在中国医院脑保护类用药中,胞磷胆碱是临床用量最大的神经激活剂,2007年国内医院胞磷胆碱水针、粉针和输液注射剂用药总量已达到11268万支。在中枢神经损伤后,胞磷胆碱可参与修复和再生,起神经保护作用;在神经介质的转移和生物电的传导中也起重要作用。该药不但可以治疗颅脑损伤和脑血管意外所引起的神经系统的后遗症,并可用于帕金森综合征和老年性痴呆症的辅助治疗。对急性中风、外科手术后引起的神经损伤、意识障碍、青光眼等有明显的临床治疗效果,还可超说明书用于肝性脑病、妊娠剧吐、新生儿缺氧缺血性脑病和流行性乙肝脑炎
胞二磷胆碱可以用化学合成法制备,但与之相比发酵制备方法明显具有成本低、产率高及操作简便等优点。南通秋之友生物技术有限公司利用啤酒厂中购买的下脚料湿酵母等为原料,发酵制备胞二磷胆碱。但购买的湿酵母来源不稳定且质量无法控制及成本较高,自己发酵培养酵母与之相比更有优势。
由于生产胞二磷胆碱的酶系均在酵母细胞内部,故而为了使底物和产物能自由进出,必须改善细胞壁和膜的通透性,一般是将酵母菌体风干或冷冻干燥备用。从啤酒厂中购买的下脚料湿酵母进行筛选纯培得的到纯种啤酒酵母,冷冻处理后几乎没有转化率,因而选择对风干处理。而干酵母的转化率不够高,没有达到实际生产要求,所以本课题的研究旨在通过对反应条件的探讨,对胞苷酸、磷酸胆碱等反应底物进行调整,实现以最大限度的的降低生产成本同时又可以得到最高产量的目的。本次实验所以用酵母的种类:大富豪啤酒酵母、华光啤酒酵母、雪花啤酒酵母。
二、研究内容和研究方法
1 内容
实验预计有以下内容:探究CDPC反应过程中的最佳酵母量、探究CDPC反应过程中的最佳葡萄糖量、探究CDPC反应过程中的最佳磷酸胆碱量、探究CDPC反应过程中的最佳胞苷酸量、对以上几个变量进行正交实验。
2 方法
2.1 快速电泳的胶板的铺制
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